除虫菊的组织培养和试管快繁

杨建芬1 王克虹2 李勇

（1深圳市仙湖植物园）

（2深圳市下坪垃圾填埋厂）

　

摘 要：以除虫菊顶芽、种子为外植体进行试管繁殖，结果表明：在培养基（1）MS+6-BA0.5mgL-1（单位下同）+NAA0.05 （2）MS+6-BA2+NAA0.05 均能诱导出丛芽，而且继代增殖效果较好。不定芽在?MS+IBA2培养基上培养，生根率可达95%以上。试管苗移栽成活率可达90%以上。

关键词：除虫菊 组织培养 快速繁殖 外植体

　

Tissue culture and rapid propagation of Pyrethrun cinerariifolium（Chrysanthemum cinerariifolium）

YANG Jian-fen1, LI Yong1, WANG Ke-hong2

（1Shenzhen Fairy Lake Botanical Garden）

　

　

Key words：Pyrethrun cinerariifolium（Chrysanthemum cinerariifolium）；Tissue culture；Rapid propagation；Explants

Abstract：Using the shoots and the seeds as explants, the Pyrethrun cinerariifolium（Chrysanthemum cinerariifolium）was propagated. The results showed that the caespitose buds could be induced on the medium（1）MS+6-BA0.5mgL-1（单位下同）+NAA0.05 （2）MS+6-BA2+NAA0.05 .And the following generations had a better multiplication effect. On the medium?MS+IBA2,The rooting rate was above 95%.The survival rate of transplantation was above 90%.

1目的、材料和方法

   除虫菊为多年生草本，原产欧洲的南斯拉夫达尔马提亚群岛，现世界各地多有分布，我国南北都有栽培[1]。除虫菊提取的除虫菊素对昆虫有强大的触杀作用，害虫接触药剂后在几分钟内迅即麻痹、中毒死亡。除虫菊素没有胃毒作用和熏蒸作用，但有一定驱避作用。除虫菊素对人几乎无毒；使用极为安全，对植物也没有药害。因此，用除虫菊提取物防治害虫，代替农药来防治害虫，对环境保护具有重要的意义。但是，除虫菊优良品系较少，若用分根、种子等常规繁殖方法，繁殖速率太慢，采取试管快繁，可提高繁殖速率。

   试验用除虫菊是由下坪垃圾填埋厂提供的。从除虫菊植株上摘取顶芽，除去大叶片后，用自来水冲洗5min，滤纸吸干，先用75%的酒精浸泡1 min后，再用0.1%HgCL2消毒8-10 min，无菌水冲洗5-6次后，切去外植体与消毒液接触的伤口部分，切成0.5-1cm长的顶芽，接种于培养基上。从除虫菊植株上采收已经成熟的种子，先用75%的酒精浸泡2 min后，再用0.1%HgCL2消毒30min，无菌水冲洗6-8次后，接种于培养基上。

2培养条件

   诱导分化芽和继代培养基以MS为基本培养基，诱导生根培养基以?MS为基本培养基，附加3%的蔗糖，0.65%的琼脂及不同浓度配比的激素，PH调至5.8。适宜的培养温度为25±2℃，光照17h。d-1，光照度2000lx。

3结果与分析

3.1不定芽的分化与丛生芽的诱导

    外植体经消毒处理后，接种于培养基（1）MS+6-BA0.5mgL-1（单位下同）+NAA0.05 （2）MS+6-BA2+NAA0.05中，顶芽外植体，在起始培养基中，逐步增大长高，接种25d后，开始从基部分化出浅绿色小芽，并逐渐长成小丛芽。用种子作为外植体， 接种于培养基（1）、（2）中，3d后开始萌发，10d后切去胚轴、胚根，继续接种于培养基（1）和（2）中，10d后长出丛芽。

3.2不定芽的继代增殖

    将初代培养的丛芽，切割成单芽后，接种于培养基（1）、（2）中，进行继代培养。结果在（2）中的芽增殖倍数明显大于（1），但（1）中生长的不定芽明显高于（2）。不管在那一种培养基中，25d左右转接一次，时间过长，芽会出现黄化现象。我们是2001年6月底处理的外植体，7月底开始有大量丛生芽产生。从2001年7月?/FONT>2002年4月，不定芽均能正常生长和增殖，2002年5月开始，不定芽的增殖倍数下降、生长高度也受到影响，2002年8月底开始不定芽又能正常生长和增殖。从这一点，可以看出除虫菊的试管繁殖有受季节影响的现象，但这一现象还须进一步的观察和研究。

3.3壮苗

   分化培养基上的芽增殖能力强，但直接转接到生根培养基中，生根率较差。转至MS+6-BA0.2[2]培养基中进行壮苗培养后，再进行生根培养，效果很好。

3.4生根与移栽

    将培养好的芽转接在?MS+IBA2培养基上进行生根培养，11d后开始长出不定根，生根率可以达到100%。除虫菊生根5d后，就必须移栽，时间过长，不定根发黑，影响移栽成活率。栽培方法，直接从培养瓶中取苗不经练苗，洗去培养基后栽培于疏松通气的栽培介质中，试验表明珍珠岩栽培效果较好。栽后需覆盖塑料薄膜保湿，并使温度保持在20-28℃之间，一周后开始揭膜通风，二周后完全去除塑料膜，但栽培介质在栽培前需消毒处理，而且移栽成活后的苗木，每隔7-10d喷洒一次[3]百菌清或多菌灵保苗，连续喷洒4-5次，这样移栽成活率可以达到90%以上。

参考文献

1曹孜义 刘国民主编 实用植物组织培养教程. 甘肃科学技术出版, 318

2曹孜义 刘国民主编 实用植物组织培养教程. 甘肃科学技术出版, 319

3谭文澄 戴策刚主编 观赏植物组织培养技术. 中国林业出版社，105