蓝花楹的组织培养和快速繁殖

李勇 杨建芬 张朝成

（深圳市仙湖植物园 深圳 518004）

　

摘要：以蓝花楹顶芽及带腋芽的茎段为外植体进行试管繁殖，结果表明：在培养基（1）MS+6-BA 0.5mg.L-1(单位下同)+NAA0.05 (2) MS+6-BA 2 +NAA0.05 (3) MS+6-BA 4 +NAA0.05均能诱导出丛芽，而且继代增殖效果较好。不定芽在?MS+IBA 2 + NAA0.75+CH0.25 g.L-1（单位下同）培养基上，生根效果最好，生根率可达95%以上。试管苗移栽成活率可达90%以上。

关键词：蓝花楹 组织培养 快速繁殖 外植体

　

Tissue culture and rapid propagation

of Jacaranda mimosifolia D.Don

LI Yong, YANG Jian-fen, ZHANG Chao-cheng

Shenzhen Fairy Lake Botanical Garden

　

Abstract: Using the shoots and the stem-segments with axillary buds as explants, the Jacaranda mimosifolia was propagated. The results showed that the caespitose buds could be induced on the medium (1) MS + 0.5 mgL-1 6-BA 0.05 mgL-1 NAA, (2) MS + 2 mgL-1 6-BA + 0.05 mgL-1 NAA and (3) MS+ 4mgL-1 6-BA + 0.05 mgL-1 NAA. And the following generations had a better multiplication effect. On the medium (1/2 MS + 2 mgL-1 IBA + 0.75 mgL-1 NAA + 0.25 gL-1 CH ),The rooting effect was best, and the rooting rate was above 95%. The survival rate of transplantation was above 90%.

Key words: Jacaranda mimosifolia D.Don; Tissue culture; Rapid propagation;Explants.

　

1 目的、材料和方法

   蓝花楹（Jacaranda mimosifolia D.Don）是原产巴西的一种紫葳科木本植物[1]，每年夏、秋两季各开一次花，盛花期满树紫蓝色花朵，十分雅丽清秀，特别是在热带，开蓝花的乔木种类较罕见，而紫蓝色为冷色调，可给人们带来一种清凉感觉，所以蓝花楹实为一种难得的珍奇木本花卉。目前我国蓝花楹的种子和插条都很缺少，短期内不可能用播种和扦插来大量繁殖。因此，我们于1999年开始对蓝花楹 进行组织培养快繁的研究，并获得成功。

    实验用蓝花楹为仙湖植物园引种区所种植的蓝花楹实生苗。从生长旺盛、健壮的蓝花楹植株上摘取茎顶芽或带腋芽的茎段，除去大叶片后，用自来水冲洗5min，滤纸吸干，先用75%的酒精浸泡1min后，再用0.1%HgCl2消毒8-10min，无菌水冲洗5-6次后，切去外植体与消毒液接触的伤口部分，切成0.5cm-1cm长的芽或带腋芽的茎段，接种于培养基上。

2 培养条件

   诱导分化芽和继代的培养基以MS为基本培养基，诱导生根培养基以?MS为基本培养基，附加3%的蔗糖 ，0.65%的琼脂及不同浓度配比的激素，PH调至5.8。适宜的培养温度为25 ±2℃，光照16h.d-1，光照度2000lx。

3 结果与分析

3.1不定芽的分化与丛生芽的诱导

   外植体经消毒处理后，接种于培养基(1)MS+6-BA 0.5mg.l-1(单位下同) +NAA 0.05，（2）MS+BA 2+NAA 0.05（3）MS+BA 4+NAA 0.05中，顶芽外植体，在起始培养基中，逐步增大，长高，开始叶片较大，接种后10d，基部稍有膨大，略有绿色愈伤组织。20d后，开始从基部分化出浅绿色小芽点，并逐渐长成小丛芽。带腋芽的茎段作为外植体时，腋芽先萌发，后逐步形成丛芽。顶芽和腋芽在三种培养基上均能启动分化，但分化频率各异。（3）中分化出的不定芽最多，但芽小、愈伤组织块大；（1）中愈伤组织边缘较疏松。

3.2 不定芽的继代增殖

   将初代培养所得的丛芽和腋芽切割成单芽后，接种于不同的培养基上，进行继代培养25d，其结果见（表一）[2]。

表一：不同6-BA浓度对继代培养的幼芽分化和生长的影响

　

编

号

　

培养基中附加的成分

6-BA浓度（mg.l-1）

　

接 种

幼芽数

　

获得芽数

　

平均单芽

分化系数

≥1.5cm的芽占分化的芽数的比率

（1）

MS+6-BA 0.5

35

81

2.3

46.5

（2）

MS+6-BA 2

35

131

3.7

21.6

（3）

MS+6-BA 4

35

144

4.1

9.4

（4）

MS+6-BA 5

35

111

3.2

0

（5）

MS+6-BA 10

35

107

3.1

0

注：各培养基还加NAA0.05，蔗糖3%，琼脂0.65%。

    从五种培养基可以看出，在培养基（3）上，芽的分化率最高，但大于≥1.5cm的芽数较少。在培养基（2）上，芽的分化率仅次于（3）培养基，但≥1.5cm的芽数却高于（3）培养基。（1）培养基的分化率是最低的，但≥1.5cm的芽数却远远高于其他培养基。因此，繁殖时用（2）和（3）培养基，生根前壮苗时用（1）培养基。

3.3 不同培养基对生根的影响

   切取高度2-3cm，生长健壮一致的幼苗，接种在不同的培养基中，培养25d调查各培养基的生根效果。（表二）[3]

　

　

不同培养基对生根的影响

培养基中附加成分

供试不定芽个数

生根的不定芽个数

平均每个不定芽生根数(条)

生根

率（%）

?MS+IBA0.5+NAA0.5+CH250

98

65

 　

66.32

?MS+IBA0.5+NAA0.5

98

43

 　

43.88

?MS+IBA 1.0+NAA1.5+CH250

98

76

 　

77.55

?MS+IBA 1.0+NAA1.5

98

54

 　

55.10

?MS+IBA1.0+NAA0.5+CH250

98

21

 　

21.43

?MS+IBA1.0+NAA0.5

98

4

 　

4.08

?MS+IBA2.0+NAA0.75+CH250

98

95

4.1

96.94

?MS+IBA2.0+NAA0.75

98

58

 　

59.18

?MS+IBA1.0+NAA0.5+CH 250

112

71

 　

63.39

?MS+IBA1.0+NAA0. 5

112

25

 　

22.32

?MS+IBA1.5+NAA0.5+CH250

112

69

 　

61.61

?MS+IBA1.5+NAA0.5

112

19

 　

16.96

   结果表明以?MS+IBA2.0+NAA0.75+ CH250培养基生根效果最好。

4.温度对蓝花楹继代培养的影响

   根据我们试验的结果，蓝花楹适宜的生长温度在25-28℃，但对低温特别敏感，低于20℃，尤其在15℃以下，刚转接的芽易死亡，已经培养一段时间的愈伤组织块和下部叶片发黑，并向上发展。蓝花楹耐受的最高温度可以达到36℃，但不能持续耐受高温，温度过高，芽尖枯死。温度在25-28℃或以上时，25d左右转接一次，超过30d芽尖端发黄枯死。温度在20-22℃时，转接时间可延长至45d-50d。（表四）

　

培养基

培养温度

20-22℃

25-28℃

28℃-30℃

（1）MS+6-BA0.5 +NAA 0.05

叶大而展开，无新芽产生，转接的单芽独立生长，苗粗壮，深绿色

生长健壮，有新芽产生，超过1.5cm的芽较多，苗适中，浅绿色

生长速度快，芽细弱，芽较多，周转周期不能超过30d，否则，芽尖发黄枯死

（2）MS+6-BA 2+NAA 0.05

转接后10d左右，有新芽产生，随后部分枯死

比前面的苗细小，分化数比前面的多，有1.5cm以上的芽生长，浅绿色

部分芽黄绿，较脆，很像玻璃苗，又不同于玻璃苗，在25-28℃时转接于（1）中，又恢复正常生长

（3）MS+6-BA 4+NAA 0.05

转接后10d左右，有新芽产生，过后基部发黑，最后整个死亡

分化芽丛密集，苗细小，生长一致，较少有1.5cm以上的芽产生

几乎均为黄绿色，芽脆

　

5．移栽

    蓝花楹试管苗生根15d后，就可以移栽。栽培方法，直接从培养瓶中取苗不经练苗，洗去培养基后栽培于疏松通气的土壤中。栽后需覆盖塑料膜保湿，并使温度保持在20-28℃之间，1周后开始揭膜通风，2周后完全去除塑料膜，但土壤需消毒处理，移栽成活率可达90%以上。

　

参考文献

1王发祥，梁蕙波，罗蒙主编。深圳园林植物。北京：中国林业出版社，1998 209

2 张巨祥。大山楂成年树茎尖离体培养试验研究。中国农业科学，1985.(3):16

3顾亨森,高翠华,王淑芬.由水仙愈伤组织产生再生植株.植物学报,1987,28(3):336-339